肉的宰后嫩化主耍归因于肌原弹性纤维材料素设备构造的被破坏，肌原弹性纤维材料素设备构造是由内源性淀粉酶质溶解酶挥发肌原弹性纤维材料素和组织内部骨架淀粉酶质发生的。与更多的年来始终是关注新闻原点的钙淀粉酶质酶不一，胱天淀粉酶质酶（caspases）附近已成为感很感兴趣说说题。胱天淀粉酶质酶在组织内部凋亡的连接时期起着至关关键的角色，这之中caspase-3在生前淀粉酶质溶解中的角色是双几个方面和冗杂的，那么应当进一大步探析。S-亚硝基化依据控制钙保持、力量排泄、淀粉酶质质挥发和组织内部凋亡来控制肉嫩，主要包括嫩度和持水能力素质。品牌的校园营销推广活动在初期探析发掘S-亚硝基化就可以调低依赖于线粒体的caspase-3级联不起作用，这可能性是相关肌肉组织内部凋亡和牛羊肉品質变化规律的缘由。caspase-3的探析内容是其与组织内部凋亡的相互关系，虽然，没有有探析研究方案S-亚硝基化控制caspase-3的制度化。

2024年9月由广州农产品加工本科大学张万刚教学团队图片在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱菌物为该研究提供了亚硝基化遮盖组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

繁体中文版头：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

学术期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2028年损害细胞因子：5.7

先生发表周期：2024年9月

顾客工作单位：南京农业大学

设计文件：蛋白

拜谱供应技术性：亚硝基化修饰组学

方法自驾路线：

一、钻研可是

01.Caspase-3渗透性

现阶段尚不模糊不清NO对caspase-3的仰创用途有没归因于NO介导的S-亚硝基化，多种浓硫酸浓度梯度方向的GSNO当做外源性NO销售，以诱惑caspase-3的离体S-亚硝基化。效果证实，与并没有GSNO的组相比之下，100、200和400μM GSNO组的caspase-3活力酶类偏态变低（图1），与前者新闻稿一样。GSNO正确处理变低caspase-3活力酶类的不确定原因分析仍急待阐释。

图1 各种不同氧浓度的GSNO正确处理对caspase-3几丁质酶的会影响

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化因素

探讨方案Caspase-3的亚硝基化水平，以揭示GSNO对Caspase-3的产生反应性。经GSNO处里后，验测到caspase-3血清S-亚硝基化承载力增长（图2）。许多的结果证实，外源性GSNO培养出可取得胜利成脂caspase-3的休外S-亚硝基化。最让人诧异的是，在还没有GSNO的存在的对比组中验测到一种忽闪的S-亚硝基化带，这证实caspase-3可能性产生内源性的S-亚硝基化。不仅如此，本探讨方案中caspase-3的S-亚硝基化水平较高，而caspase-3的吸附性消减，这与过后的探讨方案一样的。但是，caspase-3的特异形S-亚硝基化遮盖位点尚不清，还需要进这一步的探索世界。

图2 GSNO处理对caspase-3S-亚硝基化程度的损害

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化装饰组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的编码回文序列。白色标签的编码回文序列说明S-亚硝基化肽，黄色标签的C说明S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱仪

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3光降解结淀粉酶

结球蛋清酶做为1种更关键的组织骨架球蛋清酶，在达到肌组织成分的成分详细系统的性和收縮性角度起着更关键用，科研S-亚硝基化caspase-3对结球蛋清酶生物分解的灵敏性更具更关键积极意义。与Std（未用胱天球蛋清酶酶-3和GSNO孵育的刚开始肌玻纤球蛋清酶）组比起来，0 μM GSNO组（肌原玻纤和caspase-3的孵育，无GSNO）的详细系统的结球蛋清酶含碳量相关性降，显示caspase-3对结球蛋清酶更具暗藏的球蛋清酶水解反应作用。在GSNO孵育后，详细系统的结球蛋清酶的含碳量很深加入（P < 0.05）。因此，当GSNO质量浓度增高时，详细系统的结球蛋清酶的含碳量不断地上涨（P < 0.05）（图5）。这种察觉意味着，SNO突显的caspase-3以层次信任的具体方法调控结球蛋清酶的生物分解。

图5.S-亚硝基化caspase-3化学降解结球蛋白

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3生物降解肌钙淀粉酶-T

肌钙血清酶-T (TnT)是原肌球血清酶调接开展肩部肌肉缩水的丝条的必需品肌原玻璃黏胶植物纤维血清酶。TnT的化学光化学挥发结构特征是探测到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化前提下，caspase-3对TnT的化学光化学挥发情况发生下图6已知，与Std组（只含caspase-3和GSNO的肌原玻璃黏胶植物纤维）想必，caspase-3组中30 kDa TnT段落正相关扩大，反映caspase-3参入了TnT的化学光化学挥发，再者，caspase-3与GSNO的孵育诱发30 kDa TnT回落。在100和200 μM GSNO组彼此都没有探测到相关性的不同(P > 0.05)，而当GSNO的浓硫酸浓度高于400 μM 时，该段落正相关抑制性(P < 0.05)。那些反映出反映了SNO突显语的caspase-3对TnT化学光化学挥发的抑制性意义。结血清酶和TnT是caspase-3的比较敏感底物，而GSNO外理减低caspase-3的几丁质酶还可以诱发肌原玻璃黏胶植物纤维血清酶化学光化学挥发限度减低。表明表明，NO诱导型的S-亚硝基化还可以按照突显语半胱氨酸残基来调接caspase-3的几丁质酶，因此进两步导致其对结血清酶和TnT的血清酶淀粉水解的能力，然而导致牛肉片品味。

图6. S-亚硝基化caspase- 3生物降解肌钙蛋清-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结ppt

本调查有何意义研究方案S-亚硝基化对caspase-3突显的危害还有其继而对鸡肉肌原弹性人造纤维体内吸附的危害。球球淀粉酶S-亚硝基化能否突显caspase-3的半胱氨酸残基，为了引发caspase-3活力性减小，逐步骤促使了其对鸡肉肌原弹性人造纤维球球淀粉酶的球球淀粉酶水解反应本事。

三、拜谱工作小结

调查进行了酶活旋光度的测定，亚硝基化突显组学进行分析，WB等检查测量工作机制，找到血清质S-亚硝基化能够 突显caspase-3的半胱氨酸残基，这出现了caspase-3吸附性的大幅度降低，并举十步克制了其对牛羊肉肌原钎维血清质的血清质油脂水解工作能力。本调查为说明血清质质亚硝基化对吃起来的宏观调控工作机制展示 了一大个新的第一人称视角。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的淀粉酶质组学、突显淀粉酶质组学、分解代谢组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸产品的产品的，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺过酸、total氧化物保存、游离子巯基，欢迎大家咨询！

参看论文资料：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663